سیستم های تصویربرداری با وسترن بلات قبلاً برای اندازه گیری سیگنال های سنجش میکروپلیت پلاستیک سازگار شده اند. این می تواند یک اندازه گیری صرفه جویی در هزینه باشد زیرا سیستم های تصویربرداری با وسترن بلات تجهیزات آزمایشگاهی متداول هستند و در صورت عدم دسترسی به سیستم ، می توانند یک چراغ سنج اختصاصی را جایگزین کنند. یکی از محدودیت های قبلاً شناخته نشده این است که سیگنال های ضبط شده توسط دوربین ها در این سیستم ها برای همه چاه ها برابر نیستند. سیگنال ها به زاویه بروز دوربین و در نتیجه محل چاه روی میکروپلیت بستگی دارند. در اینجا ما نشان می دهیم:
• موقعیت یک چاه روی یک میکروپلیت به طور قابل توجهی سیگنال گرفته شده توسط یک سیستم تصویربرداری متداول وسترن بلات را از روش سنجش نورانی تأثیر می گذارد.
• اثر موقعیت چاه به راحتی قابل اصلاح است.
• این روش را می توان برای سنجش های درخشان تجاری در دسترس استفاده کرد ، و این امکان را برای اندازه گیری توان بالا از طیف گسترده ای از فرآیندهای بیولوژیکی و واکنشهای بیوشیمیایی فراهم می آورد.
قابل اعتماد و متخصص:
جزئیات روش
اطلاعات پس زمینه
سنجش های درخشان یک روش ساده ، حساس و پر توان برای اندازه گیری طیف گسترده ای از فرآیندهای بیولوژیکی ارائه می دهد. از آنجا که نور ساطع شده از سنجشهای درخشان نتیجه یک واکنش شیمیایی یا بیوشیمیایی است ، نسبت به سایر روشهای تشخیص سنجش مانند جذب یا فلورسانس منحصر به فرد پیچیده تر است. این روش ها به تجهیزاتی نیاز دارند که حداقل دارای منبع و سنسور نور باشند ، در حالی که برای تشخیص نور لامپ فقط به یک سنسور نیاز دارد. اینکه آیا یک سنجش گزارشگر مبتنی بر لوسیفراز برای مطالعه بیان ژن یا روش لومینو متر شیمیایی نور برای اندازه گیری واکنشهای بیوشیمیایی استفاده می شود ، به طور کلی تصور می شود که یک اسپکتروفتومتر که توانایی تشخیص سیگنال لومینسانس را دارد ، مورد نیاز است. گزارش های قبلی نشان داده اند که دستگاه های ارزان قیمت معمولی ، مانند تلفن های هوشمند ، می توانند جایگزین تجهیزات معمولی گران قیمت شوند [1] ، [2]. از سادگی اندازه گیری لومینسانس می توان استفاده کرد ، زیرا سایر تجهیزات ، از جمله دوربین های CCD ، می توانند نور ساطع شده از یک واکنش درخشان را به یک سیگنال دیجیتال برای تعیین کمیت تبدیل کنند. پیش از این نشان داده شده بود که یک سیستم تصویربرداری با وسترن بلات می تواند برای تشخیص و اندازه گیری قابل اعتماد سیگنال های درخشان سازگار باشد [3]. اگر استفاده از یک قطعه معمولی از تجهیزات آزمایشگاهی مانند این وجود داشته باشد ، در صورت عدم حضور یک لامپومتر اختصاصی می تواند ترجیح داده شود. اگرچه این روش دارای عملکرد قابل مقایسه با یک نور سنج اختصاصی است ، در هنگام اندازه گیری تعداد زیادی از چاه های میکروپلیت ، یا اگر چاه های اندازه گیری شده فاصله زیادی دارند ، منبع خطای دیگری معرفی می شود. همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است ، ظاهر دوربین یک چاه میکروپلیت به زاویه بروز خود دوربین بستگی دارد. چاه هایی که در نزدیکی محور نوری لنز قرار گرفته اند نمای کاملی از محتوای چاه نشان می دهند ، در حالی که محتوای چاههای بیشتر از محور نوری تا حدی در یک طرف چاه مسدود شده و سیگنال از دیواره خلاف آن منعکس می شود. سمت. این خطای پرسپکتیو ، که از آن به عنوان اثر موقعیت نیز یاد می کنیم ، به دلیل لنز آنتوسنتریک مورد استفاده در دوربین های معمولی است. با تعویض عدسی entocentric با یک لنز telecentric می توان این اثر چاه را به صورت نوری از بین برد. برخلاف لنزهای تلسکوپی ، پرتوهای اصلی از یک شیء به موازات محور نوری لنزها هستند ، به معنای بزرگنمایی و چشم انداز بدون در نظر گرفتن فاصله عمود بر اشیاء با محور نوری سازگار است. قبلاً از لنزهای تله سانتریك برای تصویربرداریهای بیولوژیكی و كاربردهای سنجش استفاده شده است. سیستم به جای خرید یک چراغ سنج. در اینجا ما یک روش بهبود یافته از سنجش سنجش لومینسانس را با استفاده از یک سیستم تصویربرداری متداول ، اصلاح نشده ، وسترن بلات که برای این اثر موقعیت چاه اصلاح می کند ، ارائه می دهیم ، و با افزایش دقت اندازه گیری ها در یک میکروپلیت.
عکس. 1
در یک پنجره جداگانه باز کنید
عکس. 1
نمایش نمایه یکنواخت چاه ها از نرم افزار کسب. (الف) نمای قطعه ای از ریزگرد سیاه چاه 96. هر چاه حاوی مخلوط 2: 1 v: v از محلول شیمیایی و نور آنتی بادی ضد خرگوش کونژوگه شده با HRP (1: 8000 v: v در TBST) برای حجم نهایی 100 میکرولیتر است. (ب) نمای قطعه ای از میکروپلیت سیاه 384 چاه. هر چاه حاوی مخلوط 2: 1 v: v از محلول شیمیایی و نور آنتی بادی ضد خرگوش کونژوگه شده با HRP (1: 8000 v: v در TBST) برای حجم نهایی 40 میکرولیتر است. اثر چاه موقعیت در مقایسه چاه های مرکز با چاه های لبه یا گوشه مشهود است. جعبه های قرمز نمونه هایی از منطقه انتخاب شده برای اندازه گیری در نرم افزار کمیت است.
راه اندازی تجهیزات
یک میکروپلیت رنگ سیاه و سفید 96- یا 384 چاه کاستار روی سیستم عامل تصویربرداری با وسترن بلات (G: BOX ، Syngene ، Frederick، MD) قرار گرفت. با استفاده از نرم افزار اکتساب زنده ، میکروپلیت در مرکز دید دوربین قرار گرفت تا همه چاهها
نحوه استفاده از لومینو متر (میکروب سنج)
مقالات مشابه
- کانادا به شرکت میزبان مجازی کنفرانس سازمان ملل متحد در coronavirus میان پیشنهاد برای شورای امنیت صندلی
- Forecasters predict extra nasty hurricane season this year
- فیس بوک تهدید به حذف اخبار از پلت فرم خود را در استرالیا - CNET 88801100011088 فیس بوک در برابر مقررات پیشنهادی کمیسیون رقابت و مصرف کننده استرالیا عقب رانده می شود.اندرو هویل/سی نت پس از اینکه کمیسیون رقابت و مصرف کننده استرالیا (ACCC) پیش نویس کد نظارتی را ارائه کرد که برای اجازه دادن به نشریات خبری استرالیا «برای پرداخت عادلانه برای کار روزنامه نگاران شان مذاکره می کنند» طراحی شده است، استرالیای فیس بوک در حال عقب راندن است.مدیر عامل فیس بوک استرالیا، ویل ایستون، امروز با انتشار بیانیه ای ادعا کرد که این مقررات "پویایی اینترنت را اشتباه می فهمد و به سازمان های خبری بسیار که دولت در تلاش برای محافظت از آن است آسیب خواهد دید". برای بیشتر شبیه به این مشترک شدن در خبرنامه CNET در حال حاضر برای انتخاب سردبیران ما از مهم ترین داستان های روز. ایستون ادامه داد: «با فرض تبدیل شدن این پیش نویس کد به قانون، با اکراه اجازه دادن به ناشران و مردم در استرالیا از به اشتراک گذاشتن اخبار محلی و بین المللی در فیس بوک و اینستاگرام را متوقف خواهیم کرد.»ایستون معتقد است کد نظارتی «نتیجه ای است که از منطق سرپیچی می کند و صدمه خواهد دید، نه کمک، جنب و جوش درازمدت بخش اخبار و رسانه های استرالیا.»ایستون با بیان این که فیس بوک میلیون ها دلار در شرکت های خبری محلی استرالیا سرمایه گذاری کرده است، همچنین ادعا کرد ACCC پویایی بین فیس بوک و سازمان های خبری را اشتباه می فهمد.او نوشت: «ACCC فرض می کند که فیس بوک بیشتر در رابطه اش با ناشران سود می برد، زمانی که در واقع معکوس درست است.» وی تصریح کرد: اخبار نشان دهنده کسری از آنچه مردم در فید خبری خود می بینند است و منبع درآمد قابل توجهی برای ما نیست. با این حال، ما تشخیص می دهیم که اخبار نقش حیاتی مهمی را در جامعه و دموکراسی فراهم می کند و به همین دلیل است که ما ابزارها و آموزش های رایگانی را ارائه می دهیم تا به شرکت های رسانه ای کمک کنیم تا بارها بزرگتر از آنچه قبلاً داشته اند به مخاطب برسند.»ACCC بلافاصله درخواست اظهار نظر را پس نداد.گوگل همچنین در برابر مقررات پیشنهادیعقب رانده است ، ادعا می کنند که آنها "قرار دادن خدمات رایگان شما در معرض خطر قرار داده است".در پاسخ، ACCC ادعا کرد که گوگل مجبور به شارژ کاربران نخواهد شد، "مگر اینکه این کار را انتخاب کند". ACCC معتقد است مقررات پیشنهادی آن «به عدم تعادل قدرت چانه زنی قابل توجهی بین کسب و کارهای رسانه های خبری استرالیا و گوگل و فیس بوک خواهد پرداخت.»بر اساس پیشنهاد ACCC، شرکت هایی مانند فیس بوک و گوگل سه ماه وقت خواهند داشت تا با سازمان های رسانه ای استرالیا مذاکره کنند.ACCC در بیانیه ای اعلام کرد: یک بخش رسانه های خبری سالم برای یک دموکراسی خوش عملکرد ضروری است.88801100011088 کاربران را می توان از به اشتراک گذاری اخبار مسدود شده ، فیس بوک ادعا می کند ، اگر پیش نویس مقررات جدید در محل قرار داده شده است.
- بیش از یک دوجین آواره زیر اواخر شب آپارتمان آتش در Shelburne, N. S.
- شرکت صادرات و واردات کالاهای مختلف از جمله کاشی و سرامیک و ارائه دهنده خدمات ترانزیت و بارگیری دریایی و ریلی و ترخیص کالا برای کشورهای مختلف از جمله روسیه و کشورهای حوزه cis و سایر نقاط جهان - بازرگانی علی قانعی
- افرادی که پوشیدن ماسک صورت متوقف نمی شستن دست: مطالعه
- به کمک پدر خود را کشف خانواده درخت با صرفه جویی 30 ٪ در یک اصل و نسب تست DNA - CNET
- UK weather: Storm Francis moves on but weather warnings remain in place
- شرکت صادرات و واردات کالاهای مختلف از جمله کاشی و سرامیک و ارائه دهنده خدمات ترانزیت و بارگیری دریایی و ریلی و ترخیص کالا برای کشورهای مختلف از جمله روسیه و کشورهای حوزه cis و سایر نقاط جهان - بازرگانی علی قانعی
- FRASERWAY RV جهانی, اخبار صبح, مسابقه, قوانین